اثر پروژسترون در درد نوروپاتیک ناشی از آسیب فشاری مزمن عصب سیاتیک در موش صحرایی

The study of progesterone effect on chronic constriction injury model of neuropathic pain in rat


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی کاشان
علوم پزشکی کاشان

مجریان: حمیدرضا بنفشه

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 90062
عنوان فارسی طرح اثر پروژسترون در درد نوروپاتیک ناشی از آسیب فشاری مزمن عصب سیاتیک در موش صحرایی
عنوان لاتین طرح The study of progesterone effect on chronic constriction injury model of neuropathic pain in rat
نوع طرح طرح
محل اجرای طرح
رسته مطالعاتی تجربی
دانشکده/مرکز
زمان اجرا -روز 548
تاریخ تصویب 1390/09/08
وضعیت طرح خاتمه یافته
ضرورت انجام تحقیق

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
حمیدرضا بنفشهمجریاولPh.Dbanafsheh_h@kaums.ac.ir
اعظم مصداقی نیاهمکاراصلیPh.D mesdaghinia-a@kaums.ac.ir
جواد وردیهمکاراصلیPh.D verdi_ja@kaums.ac.ir
رسول مختاریهمکاراصلیکارشناسیmokhtarirasol@yahoo.com
غلامعلی حمیدیناظر Ph.D hamidi_gh@kaums.ac.ir

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
AcAbstract
مشکلات اجرایی و محدودیت های پژوهش
سوالات پژوهشد) فرضیات یا سؤالات تحقیق پروژسترون می تواند درد نوروپاتیک را در مدل (Chronic Constriction Injury) CCI کاهش دهد که این اثر ضد درد بصورت کاهش در یک یا چند فاکتورهای اندازه گیری شده در تست های آلودینیای حرارتی و مکانیکی و هیپر آلژزیای مکانیکی دیده خواهد شد.‌: 1. احتمالا تزریق داخل صفاقی پروژسترون درصد پاسخ به تحریک در تست استون (تست آلودنیای حرارتی) را کاهش می دهد. 2. احتمالا تزریق داخل صفاقی پروژسترون آستانه پاسخ به تحریک در تست von Frey (تست آلودنیای مکانیکی) را کاهش می دهد. 3. احتمالا تزریق داخل صفاقی پروژسترون تفاوت زمان پاسخ به تحریک در تست Plantar (تست هیپرآلژزیای حرارتی) را کاهش می دهد. constriction injury model of neuropathic pain. Eur J Pharmacol. 2012, 674: 260-264. off آزمایش 22 ثانیه می باشد. روش محاسبه پاسخ طبق فرمول زیر می باشد: میانگین پای راست ـ میانگین پای چپ = تفاوت زمانی عقب کشیدن 2 پا در صورتی که اختلاف میانگین تاخیر عقب کشیدن دو پا منفی باشد نشانگر پدیده هایپرآلژزیا حرارتی می باشد (12).
Abstract Introduction: Neuropathic pain as a kind of chronic pain results from lesions or diseases affecting the somatosensory system. The management of patients with chronic neuropathic pain remains a challenge. Several studies support the crucial role of neuroactive steroids in the modulation of pain. The present study was designed to investigate the effect of systemic administration of progesterone on expression and development of hyperalgesia and allodynia scores in chronic constriction injury model of neuropathic pain in rat. Material and Method: Experiments were carried out on male Sprague-Dawley rats (230-280g). Three to four rats were housed in a cage under a 12 h light/dark cycle with food and water available ad libitum. The CCI method was performed on the common sciatic foe induction of neuropathic pain. Progesterone at doses of 5, 10 and 15 mg/kg and its vehicle were injected intraperitoneally on days1 to 13 after the surgery to study the effect of progesterone on development of neuropathic pain and only on 14th day post-surgery in order to assess its effect on expression of neuropathic pain. The behavioural experiments includedmechanical and cold allodynia and heat hyperalgesia tests. Result: The chronic administration of progesterone significantly reduced the behavioural scores of cold- and mechano-allodynia and heat hyperalgesia but single dose of progesterone did not have any effect on behavioural scores of neuropathic pain. Our data indicate that the early chronic administration of progesterone prevents the development of neuropathic pain but its acute injection does not change the expression of neuropathic pain. Conclusion: These results suggest that progesterone could be considered as a new approach for management of neuropathic pain. Keywords: Progesterone, Allodynia, Hyperalgesia, chronic constriction injury, Rat
تعریف واژه‌های کلیدی کلیدواژه ها: درد نوروپاتیک، پروژسترون، هیپرآلجزیا، آلودینیا، موش صحرایی
منابع و ماخذ فهرست منابع: به سبک ونکوور نوشته شود (مشابه مجله فیض) 1- Teng J. Mekhail N. Neuropathic pain: mechanism and treatment options. Pain Prac. 2003; 3(1): 8-21. 2- Bridges D. Thompson S.W. Rice A.S. Mechanism of neuropathic pain. Br. J. Anaesth. 2001; 87: 12-26. 3- Woolf C.J. Maninion R.J. Neuropathic pain: Etiology, symptoms, mechanism and management. Lancet 1999; 353: 1959-64. 4- Zheng P. Neuroactive steroid regulation of neurotransmitter release in the CNS: action, mechanism and possible significance. Prog Neurobiol. 2009:134-52.. 5- Jevtovic-Todorovic V, Covey DF, Todorovic SM. Are neuroactive steroids promising therapeutic agents in the management of acute and chronic pain? Psychoneuroendocrinology. 2009 Dec;34 Suppl 1:S178-85. 6- Peng HY, Chen GD, Lee SD, Lai CY, Chiu CH, Cheng CL, Chang YS, Hsieh MC, Tung KC, Lin TB. Neuroactive steroids inhibit spinal reflex potentiation by selectively enhancing specific spinal GABA(A) receptor subtypes Pain. 2009 May;143(1-2):12-20. 7- Coronel MF, Labombarda F, Villar MJ, De Nicola AF, Gonz?lez SL. Progesterone Prevents Allodynia after Experimental Spinal Cord Injury. J Pain. 2010 Jul 30. 8- Kondo D, Yabe R, Kurihara T, Saegusa H, Zong S, Tanabe T. Progesterone receptor antagonist is effective in relieving neuropathic pain. Eur J Pharmacol. 2006 Jul 10;541(1-2):44-8. 9- Bennett, G. J., Xie, Y. K., A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man, Pain., 33 (1988) 87-107. 10- Choi, Y., Yoon, Y. W., Na, H. S., Kim, S. H., Chung, J. M., Behavioral signs of ongoing pain and cold allodynia in a rat model of neuropathic pain, Pain., 59 (1994) 369-376. 11- Chaplan SR, Bach FW, Pogrel JW, Chung JM, Yaksh TL. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 1994;53(1):55-63. 12- Hargreaves K, Dubner R, Brown F, Flores C, Joris J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 1988;32(1):77-88 13- Lacroix-Fralish ML, Tawfik VL, Nutile-McMenemy N, DeLeo JA. Progesterone mediates gonadal hormone differences in tactile and thermal hypersensitivity following L5 nerve root ligation in female rats. Neuroscience. 2006; 138(2):601-608. 14- Liu NJ, Gintzler AR. Prolonged ovarian sex steroid treatment of male rats produces antinociception: identification of sex-based divergent analgesic mechanisms. Pain. 2000 Mar;85(1-2):273-81. 15- Schumacher, M., Hussain, R., Gago, N., Oudinet, J.P., Mattern, C., Ghoumari, A.M.,. Progesterone synthesis in the nervous system: implications for myelination and myelin repair. Front Neurosci 2012, 6: 10-18. 16- Dableh, L.J., Henry, J.L.,. Progesterone prevents development of neuropathic pain in a rat model: Timing and duration of treatment are critical. J Pain Res 2011, 4: 91-101. 17- Mensah-Nyagan, A.G., Meyer, L., Schaeffer, V., Kibaly, C., Patte-Mensah, C.,. Evidence for a key role of steroids in the modulation of pain. Psychoneuroendocrinology 2009, 34 Suppl 1: S169-177. 18- Roglio, I., Bianchi, R., Gotti, S., Scurati, S., Giatti, S., Pesaresi, M., Caruso, D., Panzica, G.C., Melcangi, R.C.,. Neuroprotective effects of dihydroprogesterone and progesterone in an experimental model of nerve crush injury. Neuroscience 2008, 155: 673-685. 19- Leonelli, E., Bianchi, R., Cavalett,i G., Caruso, D., Crippa, D., Garc?´a-Segura, L.M., Lauria, G.,, Roglio, I., Melcangi, R.C.,. Progesterone and its derivatives are neuroprotective agents in experimental diabetic neuropathy: A multimodal analysis. Neurscience 2007, 144: 1293-1304. 20- Kaore, S.N., Langade, D.K., Yadav, V.K., Sharma, P., Thawani, V.R., Sharma, R.,. Novel actions of progesterone: what we know today and what will be the scenario in the future? J Pharm Pharmacol. 2012, 64: 1040-1062. 21- Hamidi, G.A., Ramezani, M.H., Arani, M.N., Talaei, S.A., Mesdaghinia, A., Banafshe, H.R.,. Ethosuximide reduces allodynia and hyperalgesia and potentiates morphine effects in the chronic
ملاحظات اخلاقی ملاحظات اخلاقی الف) لطفا بر اساس لیست کدهای اخلاقی 26 گانه (پیوست پرسشنامه طرح تحقیقاتی) و با توجه به روش مطالعه، کدهای اخلاقی مرتبط را در صفحات مربوطه مشخص نموده و در صورتی که مواردی از کدهای مرتبط در مطالعه رعایت نشده است، دلایل آن را ذکر فرمایید. کلیه اصول اخلاقی کار با حیوانات آزمایشگاهی رعایت خواهد شد، از جمله آب و غذا به حد کافی در اختیار حیوانات قرار گرفته و شرایط تاریکی و روشنائی و دمای محیط در حد امکان استاندارد حفظ خواهد شد.
اهداف و فرضیات اهداف و فرضیات الف) هدف کلی: بررسی تاثیرتزریق داخل صفاقی ( تک دز ومداوم) پروژسترون بر درد نوروپاتیک در موش صحرایی. ب) اهداف اختصاصی: الف) هدف کلی: 1. بررسی اثر تزریق داخل صفاقی ( تک دز ومداوم) پروژسترون بردرصد پاسخ به تحریک در تست استون (تست آلودنیای حرارتی) در گروه های مختلف 2. بررسی اثر تزریق داخل صفاقی( تک دز ومداوم) پروژسترون بر آستانه پاسخ به تحریک در تست von Frey (تست آلودنیای مکانیکی) در گروه های مختلف 3. بررسی اثر تزریق داخل صفاقی( تک دز ومداوم) پروژسترون بر تفاوت زمان پاسخ به تحریک در تست Heater Plantar (تست هیپرآلژزیای حرارتی) در گروه های مختلف
فهرست مطالب
تعریف واژگان تعریف واژه‌های کلیدی: درد نوروپاتیک (neuropathic pain): یک نوع درد مزمن است که در اثر آسیب به سیستم عصبی بوجود می آید . Hyperalgesia به افزایش حساسیت به محرک های دردناک و حس درد به صورت اغراق شده گفته می شود که یکی از ویژگی های درد نوروپاتیک است. Allodynia: به ایجاد حس درد در مواجهه با محرک های غیردردناک اطلاق می شود که از ویژگی های درد نوروپاتیک است. نورواستروئید: به ترکیبات استروئیدی که باعث ایجاد تغییر در فعالیت سلول های عصبی می شوند گفته می شود.
چکیدهچکیده فارسی: سابقه و هدف: در د نوروپاتیک از انواع درد های مزمن می باشد که در اثر آسیب سیستم عصبی ایجاد می شود و هنوز درمان این نوع درد با مشکلات زیادی روبروست. در سال های اخیر، مطالعات زیادی اثرات قابل توجه نورواستروئیدها در کنترل درد را گزارش کرده اند. بر این اساس در طرح تحقیقاتی حاضر، اثرات تجویز سیستمیک پروژسترون به عنوان یک نورواستروئید بر علائم رفتاری درد درد نوروپاتیک ناشی از آسیب فشاری مزمن عصب سیاتیک در موش صحرائی مطالعه شده است. مواد و روشها: این مطالعه تجربی بر روی موش های صحرایی با وزن 230 تا 280 گرم انجام شده است. برای القا درد نوروپاتیک ا ز مدل آسیب فشاری مزمن عصب سیاتیک استفاده شد. پروژسترون با مقادیر 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به دو شکل حاد فقط قبل از انجام تست های رفتاری و مزمن از روز 1 تا 13 بعد از جراحی به صورت داخل صفاقی تزریق شد. تست های رفتاری مورد استفاده شامل ارزیابی هیپرآلجزیا حرارتی و آلودینیای مکانیکی و سرمایی می باشد نتیجه گیری: تجویز مزمن پروژسترون با مقادیر 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به صورت معنی دار شدت هیپرآلجزیا حرارتی و آلودینیای مکانیکی و سرمایی را کاهش می دهد اما تجویز تک دز پروژسترون با هیچ غلظتی باعث تغییر پاسخ های رفتاری ناشی از درد نوروپاتیک نشد. این نتاج نشان می دهد که تجویز مزمن پروژسترون به خصوص در روز های آغازین درد نوروپاتیک از توسعه و ایجاد درد نوروپاتیک جلوگیری می کند و پروژسترون می تواند به عنوان یک پتانسیل درمانی جدید در پیشگیری و درمان دردهای نوروپاتیک در نظر گرفته شود. کلیدواژه ها: درد نوروپاتیک، پروژسترون، هیپرآلجزیا، آلودینیا، موش صحرایی
پیشینه پژوهشبررسی متون: پروژسترون یک هورمون جنسی زنانه است که اثراتش را از طریق تحریک گیرند های استروئیدی داخل سلولی اعمال می کند. پروژسترون بوسیله آنزیم 5-آلفا ردکتاز به 3و5 آلفا تتراهیدروکسی داکسی کورتیکوسترون و آلوپرگنانولون تبدیل می شود. به این ترکیبات وترکیبات مشابه انها مثل پرگننولون و دهیدرو اپی آندروسترون، نورواستروئید گفته می شود. نورواستروئیدها تعدیل کننده فعالیت بسیاری از مسیرهای عصبی از راه کنترل آزادسازی گلوتامات، گابا، استیل کولین و دوپامین می باشند (4). نورواستروئیدها با تعدیل فعالیت گیرنده های گابا و کانال های کلسیمی وابسته به ولتاژ باعث کاهش حس درد و ایجاد بی دردی می شوند (5). تزریق پروژسترون5 mg/kg دو بار در روز در موش صحرایی موجب افزایش گیرنده های GABA-A و کاهش رفلکس های نخاعی می شود (6). در مطالعه ای Coronel MFو همکارانش در سال 2010 نشان دادند که پروژسترون از ایجاد آلودینیای مکانیکی و حرارتی در مدل تجربی آسیب نخاعی در موش جلوگیری می کند (7). در مطالعه دیگری در ژاپن Kondo D و همکارانش نشان دادند که آنتاگونیست های گیرنده پروژسترون در کاهش علائم درد نوروپاتیک موثرند (8). از طرف دیگر مطالعات زیادی، افزایش حساسیت به درد در جنس مونث ودر حالات فیزیولوژیک مختلف که همراه با افزایش ترشح استروئیدهای جنسی زنانه هستند (مثل حاملگی) را گزارش کرده اند که هورمون اصلی مسئول این افزایش حساسیت، پروژسترون معرفی شده است (14 و 13). در مطالعه ای Schumacherو همکارانش در سال 2012 نشان دادند که پروژسترون به میزان قابل توجهی در سیستم اعصاب مرکزی سنتز می شود و پروژسترون و متابولیت های حاصل از آن در رشد و توسعه سیستم عصبی، ترمیم لایه میلینه عصبی، حفاظت از سلول های عصبی و کنرل حس درد و جلوگیری از بیماری های نورودژنراتیو نقش مهمی دارند (15). نهایتآ در مطالعه ای که توسط Dableh, L.Jو Henry, J.Lدر سال 2011 در مجله تحقیقات درد به چاپ رسیده است (16)، به اثر پیشگیری کننده پروژسترون و متابولیت های حاصل از آن در ایجاد درد نوروپاتیک اشاره شده است. با توجه به مقالات مذکور در این طرح تحقیقاتی اثر تزریق داخل صفاقی پروژسترون بر هیپرآلژزیا و آلودینیای ناشی از فشار مزمن بر روی عصب سیاتیک در موش صحرایی بررسی خواهد شد
روش پژوهش(جامعه، محیط پژوهشی،حجم نمونه و چگونگی تعیین،...) مواد و روشها: این مطالعه تجربی بر روی موش های صحرایی با وزن 230 تا 280 گرم انجام شده است. برای القا درد نوروپاتیک ا ز مدل آسیب فشاری مزمن عصب سیاتیک استفاده شد. پروژسترون با مقادیر 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به دو شکل حاد فقط قبل از انجام تست های رفتاری و مزمن از روز 1 تا 13 بعد از جراحی به صورت داخل صفاقی تزریق شد. تست های رفتاری مورد استفاده شامل ارزیابی هیپرآلجزیا حرارتی و آلودینیای مکانیکی و سرمایی می باشد روش تجزیه و تحلیل داده ها و بررسی آماری: نتایج بصورت میانگین ± انحراف معیار بیان شده و از آزمون آنالیز واریانس یکطرفه و متعاقب آن تست توکی جهت مقایسه گروههای کنترل و آزمایش در هر مرحله استفاده می گردد. سطح P<0.05 معنی دار در نظر گرفته شده است.
روش جمع آوری اطلاعات اطلاعات مربوط به روش اجرای طرح الف) جمعیت مورد مطالعه و خصوصیات آنها: موش های صحرائی نر از نژاد Sprague-Dawley با وزن 300-200 گرم ب) روش نمونه گیری احتمالی: تصادفی ساده ج) حجم نمونه: (روش محاسبه ذکر گردد) با توجه به مطالعات انجام شده هر گروه شامل 8 سر موش صحرائی است (7) .
دانستنیهای پژوهش( چارچوب پنداشتی)
بیان مسئله (مقدمه، سابقه علمی و هدف تحقیق) بیان مسئله (مقدمه، سابقه علمی و هدف تحقیق): درد نوروپاتیک، یکی از مهم ترین انواع دردهای مزمن است که با وجود پیشرفت های رور افزون علم پزشکی، درمان آن با مشکلات زیادی همراه است. درد نوروپاتیک در اثرآسیب سلول های عصبی و اختلال در عملکرد سیستم عصبی مرکزی، محیطی و یا اتونوم ایجاد می شود(1). درد نوروپاتیک همراه با ایجاد حس ناخوشایند سوزش و گزگز (Dysesthesia) ، افزایش حساسیت به محرک های دردناک (Hyperalgesia) و حس درد در مواجهه با محرک های غیر دردناک (Alldoynia) می باشد. از شایعترین انواع درد های نوروپاتیک، می توان به درد های ناشی از نوروپاتی دیابتی، درد های بعد از عفونت های هرپسی و دردهای ناشی از قطع عضو (Phantom limb pain) اشاره کرد(2). پاتوفیزیولوژی درد نوروپاتیک بسیار پیچیده است و مکانیسم های محیطی و مرکزی در ایجاد درد دخالت دارند. درد می تواند در اثر آسیب به رشته های عصبی حس درد و حساس شدن انتهای حسی در اثر آزاد شدن نوروپپتیدها و یا افزایش میزان کانال های سدیمی و کلسیمی در محل آسیب، تغییر در ناقل های عصبی و گیرنده ها بخصوص افزایش گیرند های آلفا آدرنرژیک ایجاد شود. در سطح مغزی شکل گیری تغییرات آناتومیک و برقراری ارتباط بین رشته های عصبی C, A beta، کاهش فعالیت مسیرهای مهاری حس درد و آزادشدن بیش از حد ناقل های عصبی مثل گلوتامات و آسپارتات در شاخ خلفی نخاع در ایجاد درد نوروپاتیک نقش دارند (3) پروژسترون یک هورمون جنسی زنانه است که اثراتش را از طریق تحریک گیرند های استروئیدی داخل سلولی اعمال می کند. پروژسترون بوسیله آنزیم 5-آلفا ردکتاز به 3و5 آلفا تتراهیدروکسی داکسی کورتیکوسترون و آلوپرگنانولون تبدیل می شود. به این ترکیبات وترکیبات مشابه انها مثل پرگننولون و دهیدرو اپی آندروسترون، نورواستروئید گفته می شود. نورواستروئیدها تعدیل کننده فعالیت بسیاری از مسیرهای عصبی از راه کنترل آزادسازی گلوتامات، گابا، استیل کولین و دوپامین می باشند (4). نورواستروئیدها با تعدیل فعالیت گیرنده های گابا و کانال های کلسیمی وابسته به ولتاژ باعث کاهش حس درد و ایجاد بی دردی می شوند (5). تزریق پروژسترون5 mg/kg دو بار در روز در موش صحرایی موجب افزایش گیرنده های GABA-A و کاهش رفلکس های نخاعی می شود (6). در مطالعه ای Coronel MFو همکارانش نشان دادند که پروژسترون از ایجاد آلودینیای مکانیکی و حرارتی در مدل آسیب نخاعی در موش جلوگیری می کند (7). در مطالعه دیگری در ژاپن Kondo D و همکارانش نشان دادند که آنتاگونیست های گیرنده پروژسترون در کاهش علائم درد نوروپاتیک موثرند (8). از طرف دیگر مطالعات زیادی، افزایش حساسیت به درد در جنس مونث ودر حالات فیزیولوژیک مختلف که همراه با افزایش ترشح استروئیدهای جنسی زنانه هستند (مثل حاملگی) را گزارش کرده اند که هورمون اصلی مسئول این افزایش حساسیت، پروزسترون معرفی شده است (14 و 15). با توجه به مقالات مذکور در این طرح تحقیقاتی اثر تزریق داخل صفاقی پروژسترون بر هیپرآلژزیا و آلودینیای ناشی از فشار مزمن بر روی عصب سیاتیک در موش صحرایی بررسی خواهد شد
بحث و نتیجه گیری نتیجه گیری: تجویز مزمن پروژسترون با مقادیر 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به صورت معنی دار شدت هیپرآلجزیا حرارتی و آلودینیای مکانیکی و سرمایی را کاهش می دهد اما تجویز تک دز پروژسترون با هیچ غلظتی باعث تغییر پاسخ های رفتاری ناشی از درد نوروپاتیک نشد. این نتاج نشان می دهد که تجویز مزمن پروژسترون به خصوص در روز های آغازین درد نوروپاتیک از توسعه و ایجاد درد نوروپاتیک جلوگیری می کند و پروژسترون می تواند به عنوان یک پتانسیل درمانی جدید در پیشگیری و درمان دردهای نوروپاتیک در نظر گرفته شود. بحث نتایج این طرح نشان می دهد که تجویز مزمن پروژسترون با دوزهای 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به صورت داخل صفاقی از ایجاد هیپرآلجزیای حرارتی test) (Radiant Heat Plantar، آلوداینیای حرارتی (Acetone test) وآلوداینیای مکانیکی (Von Frey test) جلوگیری می کند. نتایج این مطالعه با نتایج مطالعه ای که توسط Dableh, L.Jو Henry, J.Lدر سال 2011 در مجله تحقیقات درد به چاپ رسیده است، همخوانی دارد (16). اما مطالعه ما اولین مطالعه ای است که اثر ضد هیپرآلجزیای حرارتی تجویز مزمن پروژسترون با دوزهای 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم گزارش می نماید. پروژسترون علاوه برساخته شدن در تخمدان ها و غده فوق کلیوی در سیستم عصبی نیز به عنوان یک نوروستروئید تولید می شود و علاوه بر اثرات هورمونی، اثرات عصبی زیادی نیز دارد (15). پروژسترون توسط آنزیم استروئید 5-آلفا ردکتاز در ابتدا به 5- آلفا دی هیدرو پروژسترون و سپس به 3 و 5 تترا هیدرو پروژسترون (آلوپرگنانولون) تبدیل می شود. 3 و 5 تترا هیدرو پروژسترون (آلوپرگنانولون) یک تقیت کننده آلوستریک گیرنده های گابا می باشد و در کنتر حس درد در مغز و نخاع نقش مهمی دارد (17). اثرات محافظت کننده عصبی پروژسترون در برابر انواع آسیب های عصبی مثل انواع ضایعات نخاعی و ایسکمی مغزی نیز نشان داده شده است (18). مکانیسم دقیق اثرات نوروپروتکتیو پروژسترون دقیقآ مشخص نیست. اثرات آنتی اکسیدانی پروژسترون، اثرات ضد التهاب پروژسترون و مهار تحریکات بیش از حد عصبی و پیشگیری از سمیت عصبی ناشی از این تحریکات از مهم ترین مکانیسم های محافظت کننده عصبی پروژسترون می باشد (19). در سیستم عصبی محیطی نیز پروژسترون، اثرات محافظت کننده عصبی قابل توجهی در برابر انواع نوروپاتی های محیطی از جمله نوروپاتی دیابتیک و سندرم carpel tunnel نشان داده است . پروژسترون در این بیماری ها باعث نورون زایی و افزایش تولید میلین و طول عمر سلول های عصبی می شود (20). تحقیقات زیادی از جمله تحقیق قبلی انجام شده خود ما که در سال 2012در ژورنال اروپایی فارماکولوژی به چاپ رسیده است، بیان گر نقش کانال های کلسیمی نوع T در پاتوفیزیولوژی درد های نوروپاتیک می باشد (21). احتمالآ یکی از مکانیسم های دیگر کاهش درد های نوروپاتیک به وسیله پروژسترون و متابولیت های احیا شده آن، مسدود نمودن کانال های کلسیمی نوع T می باشد. این اثر به خصوص توسط 3 و 5 تترا هیدرو پروژسترون (آلوپرگنانولون) ایجاد می شود. نتیجه گیری نتایج این طرح نشان می دهد که تجویز مزمن پروژسترون با مقادیر 5، 10 و 15 میلی گرم بر کیلوگرم به صورت معنی دار شدت هیپرآلجزیا حرارتی و آلودینیای مکانیکی و سرمایی را کاهش می دهد اما تجویز تک دز پروژسترون با هیچ غلظتی باعث تغییر پاسخ های رفتاری ناشی از درد نوروپاتیک نشد. این نتاج نشان می دهد که تجویز مزمن پروژسترون به خصوص در روز های آغازین درد نوروپاتیک از توسعه و ایجاد درد نوروپاتیک جلوگیری می کند و پروژسترون می تواند به عنوان یک پتانسیل درمانی جدید در پیشگیری و درمان دردهای نوروپاتیک در نظر گرفته شود.
پیشنهادات پیشنهادات • بررسی اثرات ضد درد پروژسترون در مدل های دیگر درد های مزمن و نوروپاتیک • مطالعه بیشتر مکانیسم های اثرات ضد درد پروژسترون • بررسی اثرات محافظت کننده عصبی پروژسترون در برابر انواع آسیب های عصبی مثل انواع ضایعات نخاعی و ایسکمی مغزی • مطالعه اثر آنتاگونیست های مختلف پروژسترون بر اثرات نوروپروتکتیو پروژسترون
روش اجرای طرح ( به طور کامل ذکر شود)) روش اجرای طرح ( به طور کامل ذکر شود): موش های صحرائی با وزن تقریبی 250-200 گرم در قفس های مختلف و در دمای مناسب حیوانخانه و شرایط تاریکی-روشنائی 12 ساعته و دسترسی آسان به آب و غذا نگهداری می شوند. حیوانات بصورت تصادفی به یک گروه شاهد که در این گروه حیوانات جراحی شده ولی عصب سیاتیک گره زده نشده و یک گروه کنترل که بوسیله بستن شل عصب سیاتیک (CCI) ، درد نوروپاتیک در انها ایجاد شده و گرو های تست که علاوه برایجاد CCI، پروژسترون داخل صفاقی دریافت می کنند، تقسیم می شوند. گروه های تست شامل 3 گروه می باشند که عبارتند از: گروه اول که فقط در روز هفتم پروژسترون دریافت می کند. گروه دوم که فقط در روز چهاردهم پروژسترون دریافت می کند. گروه سوم که از روز دوم تا چهاردهم بعد از جراحی پروژسترون دریافت می کنند. در گروه کنترل به جای تزریق داخل صفاقی پروژسترون از حلال آن که روغن بادام تلخ می باشد استفاده خواهد شد در گروه های تست اثر یکبار تزریق پروژسترون ( 10 میلی گرم بر کیلوگرم، نیم ساعت قبل از انجام تست های رفتاری) و اثر تزریق روزانه پروژسترون ( 10 میلی گرم بر کیلوگرم، از روز دوم تا چهاردهم بعد از جراحی) بررسی خواهد شد. انتخاب دز پروژسترون بر اساس مطالعات قبلی انجام شده در مورد این دارو صورت گرفته است (6و7). تست های رفتاری مربوط به ارزیابی درد نوروپاتیک در تمام گروه ها قبل از انجام عمل جراحی و در روزهای 7 و 14 بعد از جراحی انجام خواهد شد. جهت ایجاد درد نوروپاتیک از مدل CCIارایه شده توسط Bennett و Xieاستفاده خواهد شد (9). بدین ترتیب که بعد از بی هوش نمودن حیوان موهای بالا و پشت ران را کاملا تراشیده و با استفاده از تیغ بیستوری شکافی به طول 2 سانتیمتر روی قسمت خارج ران پای چپ در محل مشترک عصب سیاتیک ایجاد کرده پس از بریدن عضلات ناحیه فوق و رویت عصب سیاتیک, با استفاده از 2 میله کوچک شیشه‌ای بافت‌های اطراف عصب را جدا نموده و به وسیله نخ بخیه کات کوت 0/4 چهار گره شل به فواصل یک میلیمتر قبل از سه شاخه شدن عصب زده می‌شود. گره‌ها به شکلی ایجاد می‌گردد که اختلالی در جریان خون عصب بوجود نیاید. سپس با استفاده از نخ بخیه 0/4 سیلک عضله و پوست به صورت جداگانه دوخته می‌شود 1- آلودینیای حرارتی (پاشیدن استن به کف پا) : جهت مشخص کردن حساسیت حیوان به آلودینیای حرارتی از این تست که بر اساس روش Choi وهمکارانش می باشد، استفاده ‌می گردد (10). در این روش به وسیله یک سرنگ انسولین که به جای سوزن آن یک لوله باریک پلی‌پروپیلن قرار دارد، یک قطره استن به کف پای چپ حیوان ‌پاشیده می‌شود. این آزمایش 5 بار و هر بار به فاصله 3 دقیقه انجام می‌گیرد. درصورتی که با پاشیده‌ شدن استن حیوان پای خود را بلند کرد به عنوان پاسخ مثبت و در غیر این صورت پاسخ منفی در نظر گرفته می‌شود. بعد درصد پاسخ از طریق تعداد پاسخ مثبت حیوان نسبت به کل تعداد تحریک طبق فرمول زیر محاسبه می‌گردد (درصد پاسخ= R ). 2- آلودینیای مکانیکی (von – Frey filament) : حیوانات را بر روی یک شبکه سیمی و در داخل یک محفظه پلاکسی گلاس به ابعاد 20´20 سانتیمتر و ارتفاع 30 سانتیمتر قرار داده و بعد از عادت کردن حیوان به محیط جدید از تارهای مختلف von Frey جهت سنجش آلودینیای مکانیکی استفاده می شود. در این آزمایش از تارهای 2 تا 60 گرم ساخت شرکت Stolting استفاده می ‌گردد. این تارها در محدوده 2-4-6-8-15-26-60 گرم می باشد. از کمترین شماره تار شروع کرده و به ترتیب در صورت عدم پاسخ شماره‌های بالاتر انتخاب می‌گردد. هر تار را سه بار متوالی به فاصله 5 ثانیه و هر بار به مدت 1 ثانیه به کف پای چپ حیوان فشار داده اگر 2 بار متوالی پاسخ داده ‌شد ( پای خود را بلند می کرد ) آستانه پاسخ به حساب می آید و دیگر آزمایش ادامه پیدا نمی‌کند. در صورتی که حیوان به تار شماره 60 نیز پاسخ نداد عدد 60 به عنوان آستانه پاسخ در نظر گرفته می‌شود (11). نتایج در جداول جمع آوری و مورد آنالیز قرارمی گیرد. 3ـ هایپرآلژزیای حرارتی : با استفاده از دستگاه Plantar test و تاباندن اشعه مادون قرمز از میان سطح پلکسی‌گلاس به کف پای سالم و آسیب دیده حیوان میزان تحمل حیوان نسبت به محرک آسیب رسان حرارتی مورد سنجش قرار می گیرد. این متد قبلا توسط Bennett و همکارانش مورد استفاده قرار گرفته است (9). بدین ترتیب که با شروع تحریک یک تایمر که بوسیله یک فتوسل که به پای عقبی تابیده می شود کنترل شده و فعال می گردد. با حرکت پای عقبی یا رفلکس زمان تاخیر عقب کشیدن پا Paw Withdrawal Latency (PWL) تابش نور قطع شده و تایمر متوقف می گردد. زمان تاخیر در عقب کشیدن پا تا 1/. ثانیه محاسبه می شود. تحریکات حرارتی سه مرتبه و با فواصل 5 تا 10 دقیقه تکرار می‌شوند و Cut
معیارهای ورود و خروج مطالعه
WorkPlace
روش تجزیه و تحلیل داده ها و بررسی آماری
مشکلات اجرایی در انجام طرح و روش حل مشکلات

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
projestoron.doc1392/05/211740288دانلود